乙腈标样存储

1. 液相色谱的流动相能放置多长时间

一般要看流动相的组成了。

经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。分离后的样品是被分级收集后再进行分析的，使得经典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢，而且操作也比较复杂。

直到20世纪60年代．发展出粒度小于10μm的高效固定相，并使用了高压输液泵和自动记录的检测器，克服了经典液相色谱的缺点，发展成高效液相色谱，也称为高压液相色谱。

液相色谱所用基本概念：

保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致，但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同。

此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气相色谱有一定的差别。

2. 农药残留气相色谱法检测前处理注意事项

具体方法，农业行业标准761有！楼主问注意事项，那么按经验给您提供几点参考！
1、第一步进行制样的时候，要注意把样品打碎，打均匀，以便提取的时候能充分；
2、称样的时候，尽量不要将样品沾到称样瓶紧邻瓶口的地方，这个在加入乙腈提取液的时候，不容易冲刷下去，带来系统误差；
3、均浆时，时间2min，样品与加标样的均浆时间尤其要等同；
4、过滤的步骤中，如含有胶质的难过滤样品，可用抽滤装置；
5、氯化钠的量要适量，太少分层不明显；
6、静置具塞量筒时，时间不能少于30min,否则乙腈相与水相分层不彻底；
7、净化步骤中，通入氮气流量不能过大，否则容易使乙腈溶液飞溅而出，蒸发近干，切记不能蒸干，否则回收不好影响结果；
8、转移至离心管中使，用约3ml丙酮分三次冲洗烧杯，此步骤不能忘了在漩涡振荡器上混匀再装瓶；
以上为上PFD检测器检测，如果上ECD，则需要注意过柱步骤，预淋洗，条件化弗罗里矽柱时，一定不能让柱子干，洗脱时也是一样，否则影响回收，带来误差。
另外，这些步骤必须在通风厨中进行，否则影响操作者健康。
一时只能想起这么多，希望对你有帮助，如有别的问题需要探讨，欢迎楼主找我！

3. 萃取用乙腈溶的标曲可以用别的不

做曲线稀释的话用其他溶剂也可以,但最好还是用甲醇稀释.
做水样前处理的时候需要的萃取衍生等等,做标准曲线的时候不需要做需要萃取衍生.

4. 六种苯酚类化合物的高效液相色谱法测定

方法提要

在酸性条件下，用GDX-502固相萃取柱吸附水中酚类化合物，乙腈解析柱中有机酚，高效液相色谱-紫外检测器检测。

方法适用于饮用水、地下水及湖库水中苯酚、对硝基酚、间甲酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚6种酚类的测定。对水中6种酚通常可检测到10～50ng/L水平。

仪器

高效液相色谱仪带紫外检测器，恒流梯度泵系统。

色谱柱WatersSymmetry^C₈，4.6mm×250mm，粒径5μm或性质相似的色谱柱。

GDX-502固相萃取小柱将使用过的SPE小柱填充物去掉并清洗干净，湿法加入约为0.5g纯化溶胀后的GDX-502树脂，打开活塞放出甲醇，直到液面刚好达到树脂床顶部。用10mL乙腈淋洗树脂，再用10mL水淋洗树脂，每次淋洗保持液面不低于树脂床。

针头过滤器孔径0.45μm，直径13mm，有机系。

固相萃取装置12管固相萃取装置。

真空泵。

采样瓶1L具磨口玻璃塞的棕色玻璃细口瓶。

氮吹仪。

微量注射器10μL、50μL、100μL、1000μL等气密性微量注射器。

K.D浓缩瓶25mL，带1mL定量管，须标定容积后使用。

试剂

空白试剂水去离子水蒸馏再经Millipore处理。

高效液相色谱流动相为水(含1%乙酸)和乙腈的混合溶液。

碳酸氢钠溶液c(NaHCO₃)=0.05mol/L。

硫代硫酸钠(Na₂S₂O₃·5H₂O)。

乙腈，甲醇HPLC级。

丙酮(C₃H₆O)农残级。

乙酸。

盐酸。

标准储备溶液苯酚、对硝基酚、间甲酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚六种的混标，购自国家标准物质研究中心。保存在-18℃冰箱中。

GDX-502树脂使用前用丙酮浸泡数日，数次更换新溶剂到丙酮无色。再用乙腈回流提取6h以上。纯化后的树脂密封保存在甲醇中备用。

替代物标准2-氟苯酚和2，4，6-三溴苯酚混标。

样品的采集与保存

1)水样采集。必须采集在玻璃容器中，在采样点采样及盖好瓶塞时，样品瓶要完全注满，不留空气。若水中有残余氯存在，要在每升水中加入80mg硫代硫酸钠除氯。

2)水样保存。避光、4℃下中保存。采样后7d内完成提取。40d内完成分析。

分析步骤

1)水样预处理。用孔径0.45μm的玻璃纤维滤膜，去除水中机械杂质。根据水中酚类化合物含量，取水样50～1000mL，加入2-氟苯酚和2，4，6-三溴苯酚等替代物标准，用6mol/LHCl调至pH2。水样以10mL/min的流速流经已活化的GDX-502固相萃取柱。当水样完全流过柱子后，用0.05mol/L碳酸氢钠溶液10mL淋洗柱子。用N₂或空气将柱中水分充分抽干。用4mL每次1mL乙腈淋洗小柱，前两次淋洗液需在柱中平衡10min，后两次平衡2min，合并淋洗液，最终用乙腈定容为1.00mL。0.45μm有机相滤膜过滤，HPLC分析。

2)校准曲线。

3)高效液相色谱分析条件。

紫外检测器:双波长检测，检测波长280nm和290nm。柱温35℃。

流动相组成:A泵，99%水+(1+99)乙酸;B泵，100%乙腈。

流动相流量:1mL/min，恒流。梯度洗脱，洗脱程序，见表82.41。

表82.41 洗脱程序

4)色谱图的考察。见图82.13。

定性与定量分析

1)定性分析。以样品保留时间和标样保留时间相比较来定性。根据标准色谱图各组分的保留时间，确定出被测样品中目标物数目和名称。对有检出的样品需用其他方法确证，如GC-MS等技术。

图82.13 六种标准酚类样品在不同检测波长下的液相色谱图(2μg/mL)

2) 定量分析。每个工作日必须测定一种或几种浓度的标准溶液来检验校准曲线或响应因子。如若某一化合物的响应值与预期值间的偏差大于 10%，则必须用新的标准对该化合物绘制新的校准曲线或求出新的响应因子。使用紫外检测器时，6 种酚类的最大吸收波长不同，为提高分析灵敏度，苯酚、间甲酚采用 280nm 波长定量; 对硝基酚、2，4 -二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚采用 290nm 波长定量。计算公式参见式 (82.16) 。

方法性能指标

1) 精密度、检出限和线性范围。按实验方法，配制浓度为 0.5μg / mL 酚类混合标准样品，按选定的工作条件分析，重复检测 7 次，计算方法的精密度。检出限的测量是以相对于基线噪音 3 倍时组分峰高所对应的浓度。各组分的精密度、检测下限和线性范围见表82.42。

表82.42 方法精密度、检出限及线性范围

2) 准确度。分别将 50μL 浓度为 2μg / mL 的混合标准样品加入 0.25L 和 1.0L 试剂空白水中，用 502 树脂固相萃取柱吸附富集，洗脱后定容 1.0mL，HPLC 测定，计算加标回收率。结果见表82.43。

表82.43 方法的准确度

3) 基体加标回收率。从北京不同地区取护城河水过滤后，分别取 1L 水加入表82.44中不同量的标准样品，及未加入标准样品的 1L 水，经水样预处理，在 HPLC 上检测，得到加标回收率。

表82.44 地表污水加标回收率

注: 2-氟苯酚、2，4，6-三溴苯酚为替代物，回收率均符合控制限要求。

5. 高效液相 99%乙腈流动相 什么物质大约5分钟出峰

这个问题没办法回答。
第一，不知道波长，第二，不知道柱填料，第三不知道流速，这根本没办法判断。
而且，5min出峰，大约就是说这个物质在色谱柱中基本没有保留，还说不定是双氧水或者什么溶剂的峰呢。

液相不可能从保留时间判断出一个物质的，液相没有这个功能。除非你知道这个物质可能是A、B或者是C，然后进标样，对比后确定它是哪一个。

6. 做高液相时标样出峰时间越来越晚是什么原因

会不会是你实验室温度较高，流动相中的有机物挥发的缘故？甲醇和乙腈的挥发性都比较大。要保证流动相混合均匀，然后尽量密封。
或者和色谱柱有关，你的流动相中有没有什么需要长时间缓冲的物质，需要的平衡时间相对较强。
另外要看一看你的色谱柱柱压，是不是柱子堵了，压力上升，导致色谱峰前移。

一般一天之内色谱峰前后偏移1min都是可以接受的。

7. 测邻苯二甲酸的紫外吸收时为什么用标样进行测试

测邻苯二甲酸的紫外吸收用标样进行测试是因为，
邻苯二甲酸酯可以通过呼吸、饮食和皮肤接触进入人和动物体内。急性吸入邻苯二甲酸酯蒸汽后，可出现上呼吸道和眼结膜刺激症状。皮肤长期接触会出现致敏反应。其急性毒性随分子中醇基碳原子数的增加而减弱，具有中度积蓄作用，邻苯二甲酸酯类对大鼠有致突、致畸作用，对水生生物的急性毒性很低，但对某些水生种属有蓄积作用，能造成生殖吸引损害。随着工农业生产的发展和塑料制品的广泛使用，邻苯二甲酸酯类已经成为全球性的最普遍的一类持久性环境污染物

8. 标样配在甲醇和乙腈会不会响应值差一倍

你把标液分别配在甲醇和乙腈里，看响应值差多少，按说不会差那么多。
而且你标液的溶剂要与样品溶剂保持一致

9. 测完标样，液相色谱柱压很高，求助原因和解决方法

用完色谱柱要及时清洗。你说换柱后，显示柱压很高，有出峰，说明柱子没洗干净。另外，如果用了含缓冲盐体系的流动相，一定要先用10%甲醇or乙腈先过渡。以免有盐在管路中析出，损伤仪器和色谱柱。
另外，更换色谱柱时，在低流速（比如0.1ml/min）下换挺好的。最好要戴手套。关泵换问题也不大。
如果管路中进气泡，出的峰是很尖锐的，且压力不稳，跳上跳下很明显的。你的情况应该不是进气泡造成的。
最后补充一下，如果色谱柱长期没有用过，最好每隔2个月用有机相冲洗一下柱子。大约1ml/min，冲半小时。
以上所说的仅适用于反向柱。

10. 用乙腈溶解的标样跑的还可以,用甲醇溶解的出现肩峰

你只进一针甲醇,看一下同一个时间会不会出峰,如果出同样的峰的话,就是溶剂峰.如果样品在这个时间没有杂质峰出现的话,不用管它,不积分就可以了.