品红试剂怎么配置
1. 改良苯酚品红染液和龙胆紫醋酸洋红的区别
对于实验观察没区别,两者的作用效果是一样的。
醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。
在“观察植物细胞有丝分裂”(即“观察根尖分生区组织细胞”)时,对染色体进行染色,需要用碱性染液,此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。
改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋红染色液的染色效果是相同的。
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1、作为染色剂必须具备两个条件:一是具有颜色;二是要与被染组织间有亲和力。染料的颜色和它与组织间的亲和力是由染料本身的分子结构决定的,产生颜色的发色基团和与组织间产生亲和力的助色基团共同决定了染色剂的染色性质。
2、染色质(体)容易被碱性染料染成深色。实验中对染色质(体)进行染色,须使用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液等碱性染色剂,这些染色剂是以龙胆紫或醋酸洋红溶解于醋酸溶液中制得,配制后的龙胆紫溶液pH值约小于7(呈酸性)。
3、改良苯酚品红染液配法顺序如下: 原液A:取3克碱性品红溶于100毫升70%酒精中,此液可以长期保存。原液B:取A液10毫升加入90毫升5%苯酚(即石炭酸)水溶液中(2周内使用)。原液C:取B液55毫升加入6毫升的冰醋酸和6毫升38%的甲醛(可长期保存)。
染色液:取C液10-20毫升,加入90-80毫升45%醋酸和1.5克山梨醇。放置2周后使用,染色效果显着,可普遍用于植物组织的压片法和涂片法,使用2-3年不变质。
山梨醇为助渗剂,兼有稳定染色液的作用。如果没有山梨醇,也能染色,但效果稍差。改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸洋红染色液的染色效果是相同的。而且用改良苯酚品红染色液还能提高工效,简易节约的优点。
4、在涂抹法与压碎法中,醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。在煮沸的45%醋酸中加洋红使之饱和,再加入微量的铁离子,便使醋酸洋红材料在为醋酸固定的同时,洋红将核或染色体染成红色。PH呈酸性。
2. 如何配制无色的品红—亚硫酸钠溶液
碱性品红0.2g, 80℃热蒸馏水100mL,溶解后冷却、过滤,加10%亚硫酸钠水溶液20mL。再加酸2mL 与适量蒸馏水, 定容到200mL。
放置暗处,静置24h后,加0.25~0.5g活性炭摇荡1min,过滤,溶液呈无色,装入棕色瓶中塞紧瓶塞,保存在冰箱内(0~4℃),用前预先取出,使之恢复至室温后再用。如溶液呈粉红色就不能用,须重配。
使用这种方法时,溶液中不能存在碱性物质和氧化剂,也不能加热,否则会消耗亚硫酸,溶液恢复品红的红色,出现假阳性反应。
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受热分解而生成硫化钠和硫酸钠,与强酸接触分解成相应的盐类而放出二氧化硫。亚硫酸钠还原性极强,可以还原铜离子为亚铜离子(亚硫酸根可以和亚铜离子生成配合物而稳定)。
也可以还原磷钨酸等弱氧化剂。亚硫酸钠及其氢盐在实验室可以用于清除醚类物质的过氧化物(加入少量水,微热搅拌反应后分液,醚层用生石灰干燥,用于一些要求不高的反应)。可与硫化氢归中。