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受試物配置過程中考慮哪些問題

發布時間: 2022-08-12 13:56:15

① 化學配置溶液實驗的心得

配置溶液是化學實驗里最基本的操作之一,不必緊張。配製溶液也分為好多種,不知道是要做哪一種實驗;

化學是建立在實驗基礎上的科學,與物理學不同,配置容易的時候一定要注意操作的准確性,以提高實驗的精確度,配製溶液一般是一個實驗的開始步驟,開始步驟出錯,下面的實驗就無法進行。

(1)受試物配置過程中考慮哪些問題擴展閱讀:

用液體試劑配製:

根據稀釋前後溶質質量相等原理得公式:

ω1ρ1 V1= ω2ρ2 V2

ω1:稀釋質量分數ρ1 :密度V1:欲配溶液體積

ω2:濃溶液質量分數ρ2:密度V2:需用濃溶液體積

② 配置培養基的基本步驟有哪些應注意什麼問題

培養基的配置應該注意的幾大步驟:
1、常用玻璃儀器的准備制備培養基所用的吸管、錐形瓶、毛細吸管、平皿等玻璃儀器用前要用肥皂水洗刷後用清水沖洗干凈,晾乾後備用。
(1)平皿用紙或布包好,或裝在金屬盒內,於121℃高壓蒸汽菌3min後烘乾,備用。
(2)試管管口用棉花塞或硅氟塑料試管塞塞好,再用布或報紙包紮好,121℃高壓蒸汽滅菌20℃後烘乾,備用。
(3)吸管及滴管先用少許棉花塞於吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽內的氣體污染),然後用紙包後或裝入金屬吸管筒內,於121℃高壓蒸汽滅菌20min後烘乾,備用。其他玻璃器皿均應按上法處理,也應裝金屬筒內160℃乾熱滅菌2h後,備用。
2、培養基的制備及儲存
(1)溶化:一般應放在玻璃器皿或搪瓷齊內。加入蒸餾水,隔水加熱以促其溶解,加熱時應經常攪拌,防止焦結,待其溶解後補足水分。
在使用乾燥培養基時,先將蒸餾水按定量加入容器中,然後稱取一定量培養基乾粉放入水中,靜置10—15min,攪拌,振盪,或延長時間以促進溶解,一般不要熱,必要時加熱,但時間不宜過長,溫度不宜過高,避免某些營養成分被破壞。
(2)校正酸鹼度(調節pH):培養基必須有適當的pH。因此測定pH是培養基配製過程中的重要步驟之一,測定pH的標准溫度為25士2℃。調節pH可用無菌的1mol/l氫氧化鈉溶液或10%碳酸鈉溶液、1mol/l鹽酸溶液。當調節緩沖液的pH時,宜用6mol/l磷酸或10mol/l氫氧化鉀溶液。滅菌後的pH會比滅菌前的pH升高或降低,一般高壓滅菌前培養基的pH會比最終pH調高0.2左右,滅菌後基本合適。因此對培養基、緩沖液、試劑在滅菌前後的pH均進行測定,並記下每次pH的測定結果,有助於積累數據考察每種培養基、緩沖液、試劑對滅菌程序的耐受性,從而指導滅菌前pH的調節。乾燥培養基一般已校正過pH,用時也必須再驗證。測定時,一般用指示劑滴入培養基觀察其顏色的變化,或用pH計校正,如與所需pH不符,可用以上的酸或鹼液加以校正。調整pH後要加熱過濾,使培養基澄清。( 更多質量檢測、分析測試、化學計量、標准物質相關技術資料請參考中國標准物質 www.rmhot.com)
(3)培養基的分裝:大批量配製時使用的自動分配器須經校準和確認。每次使用前後,均要對分配器的管道系統進行沖洗,在分裝無菌培養基前,則要採用無菌硅膠管。
固體培養基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中,高壓滅菌後根據需要分裝平皿或試管。
平皿:傾注平皿,應在無菌室中放置3—4h,如用塑料平皿須在35℃培養箱 中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發。
斜面:制備低層斜面分裝於試管,約占容積1/5,滅菌後趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上,使成斜度,分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養基,如沾有培養基應用布抹去,以避免污染。
高層斜面:制備高層斜面分裝於試管,約占試管容積的1/3,滅菌後趁熱放置成高層短斜面,待其凝固後應用。
分裝好的培養基或緩沖液等及時密封後必須在配製當天(2h內最佳)進行滅菌處理。液體、半固體培養基一般在高壓滅前分裝,約裝試管容積的1/3,在滅菌後還要加其他成分的液體、半固體培養基,滅菌後再分裝於滅菌試管或錐形瓶中。
培養基的滅菌:培養基的滅菌多採用高壓蒸汽滅菌,各種培養基的滅菌時間和壓力,按其成分不同而定。普通培養基採用121℃、103.42kPa滅菌15min,但容器和裝量較大時,應延長至20min。含糖培養基115℃、68.85kPa滅菌30min。含糖、血清、 雞蛋等培養基可用流動蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,連續3d,間歇滅菌。血清或組織液,採用低熱56—58水浴1h,連續5—6d滅菌,一些遇高溫即被破壞的物質如尿素、腹水等,可用細菌過濾器,過濾除菌。高壓滅菌應嚴格按照操作規程執行,必須逐漸加熱,徹底排除滅菌器內的空氣,再逐漸升壓保持預定的壓力和時間,達到全部殺滅微生物。以上的滅菌時間和溫度要經過驗證確認,如不同類型培養基混合一起滅菌時宜採用115℃、68.85kPa滅菌30min為好。
通過無菌技術為測試制備的每一批培養基其PH在放冷至室溫(25°)後,都應測定。一個扁平的pH計用於培養基表面pH值的測定,浸入式的pH計用於液體的測定。各供應商提供的培養基的pH應該在規定的±0.2的范圍內,除非通過驗證得到更寬的范圍
注意:按配方計算培養基中各種成分的用量→稱量,(一般動作要迅速一些,因為其中可能有些成分容易吸潮)→溶化(將稱好的各種成分溶解在水中,如果是固體培養基,需要使用凝固劑,如瓊脂等,熔化時,注意攪拌,防止糊底)→調pH→滅菌(高壓蒸汽滅菌)→倒平板
1)確認培養基的成分,並精確稱量;
2)加入各個成分的順序;
3)准確調pH;
4) 適當的滅菌方法;
5)無菌條件下分裝.

③ 用高錳酸鉀配製標定溶液時,應注意什麼問題

高猛酸鹼溶液的配製需要提前配製,不能現配現用.能標定高錳酸鉀的基準物質相當多,如草酸鈉、二水合草酸、純金屬鐵絲等,一般採用草酸鈉來標定.
2MnO4- +5C2O42- +16H+ = 2Mn2+ +10CO2 ↑+8H2O
標定時因注意溫度、酸度、滴定速度、催化劑、指示劑和滴定終點.
1.溫度 在室溫下,這個反應的速率緩慢,因此常將溶液加熱至70-85℃(一般是水浴加熱到剛好冒蒸氣)時進行滴定.但溫度不宜過高,若是高於90℃,會使部分草酸發生分解.
2.酸度 酸度過低,高錳酸鉀易分解為二氧化錳;酸度過高,草酸亦易分解.一般滴定開始時的酸度應控制在0.5-1mol/L
3.滴定速度 開始滴定時的速度不宜過快,否則加入的高錳酸鉀溶液來不及與草酸根離子反應,即在熱的酸性溶液中發生分解
4.催化劑 開始加入的幾滴高錳酸鉀溶液褪色較慢,隨著滴定產物錳離子的生成 ,反應速率逐漸加快.因此,常在滴定前加入幾滴硫酸錳作為催化劑
5.指示劑 高錳酸鉀自身可作為滴定時的催化劑,但是用濃度低至0.002mol/L高錳酸鉀溶液作為滴定劑時,應加入二苯胺磺酸鈉或1,10-鄰二氮菲-Fe(Ⅱ)等指示劑來確定終點
6.滴定終點 用高錳酸鉀溶液滴定至終點後,溶液中出現的粉紅色不能持久,這是因為空氣中的還原性氣體和灰塵都能使高錳酸根還原,使溶液的粉紅色逐漸消失.所以,滴定時溶液中出現的粉紅色如在0.5-1min內不褪色,即已達到終點.

④ 配製培養基過程中應該注意什麼問題

1、為確認工作細胞庫是否受到污染,病毒種子的工作種子批次是否受到污染,培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否受到污染,可通過細菌、真菌、支原體無菌試驗確認和消除。同時,還應驗證無菌試驗介質的靈敏度。

實際生產中,可以從配製好的培養液中取少量加入營養瓊脂於恆溫培養箱內培養,48小時即可觀察有無污染。

2、高壓滅菌設備和過濾滅菌設備應進行驗證,以確保滅菌滅菌效果;高壓滅菌設備調試前後每6個月進行一次驗證,每滅菌前後(滅菌後至少一次)進行驗證。

3、有毒區域應嚴格與無毒區隔離,並應設置獨立的空氣凈化系統和培養箱。毒性區應在無毒區保持相對負壓,防止病毒污染培養細胞(特別是細胞庫)。

4、在基本培養基中加入抗生素,野生型菌株被殺死,營養缺陷型不能在基本培養基中生長而被保留下來。



(4)受試物配置過程中考慮哪些問題擴展閱讀:

配製培養基過程中的其它相關介紹:

培養基各成分完全溶解後,應進行pH的初步調正,因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會有顯著的升高。

因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的最終pH,保證培養基的質量。pH調正後,還應將培養基煮沸數分鍾,以利培養基沉澱物的析出。

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