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如何配置50ml5的bsa

發布時間: 2022-10-28 21:02:42

『壹』 1%BSA怎麼配置

這是w/v濃度。20%bsa的配製方法:在無菌條件下,稱取20.00克牛血清白蛋白(bsa),用dmem培養基[dmem(高糖)購自gibco
brl公司]溶液溶解後定容到100毫升,調ph值至7.4後用0.45
um濾膜過濾除菌(較難過濾),最後放入4℃冰箱保存。

『貳』 求封閉液中1%的BSA是怎麼配製

取1g BSA,加蒸餾水,定容到100ml就行了。

最常用的封閉劑是0.05%-0.5%的BSA,封閉是否必要,取決於ELISA的模式及具體的實驗條件。並非所有的ELISA 固相均需封閉,封閉不當反而會使陰性本底增高。

一般說來,雙抗體夾心法,只要酶標記物是高活性的,操作時洗滌徹底,不經封閉也可得到滿意的結果。

特別是用單抗腹水直接包被,因其中大量非抗體蛋白在包被時同樣也吸附在固相表面,業已起到了類似封閉劑的作用。但在間接法測定中,封閉一般是不可少的。

(2)如何配置50ml5的bsa擴展閱讀:

判斷封閉條件,要考慮在此條件下是否能達到試驗要求,即棋盤滴定要滿足:陽性樣品OD=0.8、陰性樣品OD<=0.1,而不是看你待測樣品OD變化趨勢;

過低封閉濃度勢必造成本底過高,但過高又會使靈敏度降低,因此只要選擇能夠滿足你試驗要求的最低BSA濃度就可以了。

另外提醒,洗滌一定要徹底,很重要的。

包被後封閉前一般要洗滌一遍,以便於洗掉結合不牢固的包被物,防止在實驗中影響實驗結果;封閉後一定不要洗滌,封閉的目的就是要靠蛋白填補未被包被物佔領的空間,另外封閉液一般也具有保護作用。

如果不是用biotin-avidin系統的話,用5%脫脂奶粉做封閉液就可以了,廉價,效果也很好。

封閉液一般是用5%的BSA或者是用5%的脫脂奶粉,溶劑一般使用TBST。做實驗的時候,我一直強調這樣的一個原理,那就是在了解原理的基礎之上,我們完全可以不拘泥於書本,進行創造。就拿這個封閉液來講,要是單純的一種封閉效果仍然不好的話,我們完全可以兩種合用,我就試過1%的BSA和5%的脫脂奶粉合用進行封閉的事例。所以,搞科學研究是需要我們進行再創造的。

D、BSA交聯抗原注射到兔子體內得到一抗,我們Elisa的二抗用的是羊抗兔HRP標記的二抗。請問,在封閉時,用什麼樣的封閉液比較好呢?是無蛋白封閉液,還是羊的免疫前血清?

『叄』 BSA稀釋用什麼配製

|||5%BSA均用1×PBS稀釋,看看,用PBS,你再做一次.|||5%BSA均用1×PBS稀釋,用PBS,你再做一次.|||用0.1mol/LTris-HCl配也行.|||用0.1mol/LTris-HCl配也行.

『肆』 測檢測限用的5%牛血清白蛋白溶液如何配製

每5g加100ml水.還是用PBS溶解也可以,看你的用途.按一周內能用完的分量,分裝成小支放在負20或負30度冰箱應該起碼可以放好幾個月.
不是冷凍保存的話,如果想放4度冰箱放久一點,則需要加防腐劑,比如可以用0.1% NaN3 (sodium azide) 也要看你的用途,有些實驗會受防腐劑影響.

『伍』 體積分數為0.5%的牛血清白蛋白(BSA)如何配製用水配還是用別的溶劑呢麻煩寫出詳細的配製方法,謝謝

你是干什麼用?如果是做ELISA之類免疫學實驗,用PBS就可以了,0。5%就是稱0。5克BSA然後溶在100mlPBS裡面。

『陸』 如何精確配置1.0×10-4 mol/L的BSA

BSA的分子量按67000計算
10mg/mlBSA配製:加100mg的牛血清蛋白(組分V或分子生物學試劑級,無DNA酶)於9.5ml水中(為減少變性,須將蛋白加入水中,而不是將水加入蛋白),蓋好蓋後,輕輕搖動,直至牛血清蛋白完全溶解為止。加水定容到10ml。
按自己的濃度計算稱量吧.

『柒』 BSA由0.3gBSA粉末和25ml的超純水配成,圖中5種配比稀釋後,溶液中的蛋白質的濃度是多少怎麼算的

BSA由0.3gBSA粉末和25ml的超純水配成是指BSA原液吧
也就是300mg的BSA溶解於25ml水中,濃度為12mg/ml
BSA原液0.4ml加水0.6ml後共1ml,濃度為4.8mg/ml
BSA原液0.5ml加水0.5ml後共1ml,濃度為6mg/ml
BSA原液0.6ml加水0.4ml後共1ml,濃度為7.2mg/ml
BSA原液0.7ml加水0.3ml後共1ml,濃度為8.4mg/ml
BSA原液0.8ml加水0.2ml後共1ml,濃度為9.6mg/ml
演算法就是濃度乘加入BSA體積除以總體積

『捌』 western牛奶封閉液怎麼配

推薦用TBST進行稀釋獲得5%的牛奶封閉液(5g/100mL)。

拓展:

一、牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,是牛血清中的一種白蛋白,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430 kDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,例如在western blot中作為Blocking agent;在酶切反應緩沖液中加入BSA,通過提高溶液中蛋白質的濃度,對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,能減輕有些不利環境因素如加熱,表面張力及化學因素引起的變性。

二、用途說明

1、 在酶切反應緩沖液中加入BSA,通過提高溶液中蛋白質的濃度,對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,減輕不利環境因素如加熱,表面張力及化學因素引起的變性的。

2 、ELISA中也常常用到,比如封閉液,樣本稀釋液,酶結合物稀釋液都可以用BSA。

3、生化研究,遺傳工程和葯物研究。

『玖』 配製0.3mg/mlbsa溶液濃度怎麼配

取分析純鹽酸按35%計算鹽酸純量,加水即可。如要配1000毫升15%的溶液,取428毫升分析純鹽酸,加水至1000毫升即可。

鹽酸是氫氯酸的俗稱,是氯化氫(HCl)氣體的水溶液,為無色透明的一元強酸。鹽酸具有極強的揮發性,因此打開盛有濃鹽酸的容器後能在其上方看到白霧,實際為氯化氫揮發後與空氣中的水蒸氣結合產生的鹽酸小液滴。

鹽酸分子式HCl,相對分子質量36.46。鹽酸為不同濃度的氯化氫水溶液,呈透明無色或黃色,有刺激性氣味和強腐蝕性。易溶於水、乙醇、乙醚和油等。濃鹽酸為含38%氯化氫的水溶液,相對密度1.19,熔點-112℃沸點-83.7℃。3.6%的鹽酸,pH值為0.1。

鹽酸是無色液體(工業用鹽酸會因有雜質三價鐵鹽而略顯黃色),有腐蝕性,為氯化氫的水溶液,具有刺激性氣味,一般實驗室使用的鹽酸為0.1mol/L,pH=1。高中化學把鹽酸和硫酸、硝酸、氫溴酸、氫碘酸、高氯酸合稱為六大無機強酸。氯化氫與水混溶,濃鹽酸溶於水有熱量放出。溶於鹼液並與鹼液發生中和反應。能與乙醇任意混溶,氯化氫能溶於苯。由於濃鹽酸具有揮發性,揮發出的氯化氫氣體與空氣中的水蒸氣作用形成鹽酸小液滴,所以會看到白霧。

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