做蛋白質的指示劑怎麼配置
⑴ 粗蛋白的測定中硼酸溶液怎麼配製
2%硼酸溶液:2g硼酸溶於98g純凈水中即可
混合指示液:(1)1份0.1%甲基紅乙醇溶液與5份0.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合。(2)也可用2份0.1%甲基紅乙醇溶液與1份0.1%次甲基藍乙醇溶液臨用時混合
硼酸溶液滴入混合指示液(1)呈暗紅色
硼酸溶液滴入混合指示液(2)呈紫色
⑵ 蛋白質標准溶液配製方法
用標準的結晶牛血清清蛋白(BSA)或標准酪蛋白,配製成10mg/ml的標准蛋白溶液,可用BSA濃度1mg/ml的A280為0.66來校正其純度。如有需要,標准蛋白質還可預先用微量凱氏定氮法測定蛋白氮含量,計算出其純度,再根據其純度,稱量配製成標准蛋白質溶液。
⑶ 檢驗蛋白中用的混合指示劑怎麼配
雙縮脲試劑A的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.1 g/mL的水溶溶液;雙縮脲試劑B的成分是硫酸銅的質量分數為0.01 g/mL的水溶液;0.1 g/mL的氫氧化鈉水溶液和0.01 g/mL的硫酸銅水溶液,現配現用。
⑷ 食品中蛋白質的測定通常用什麼做指示劑
一般是根據產品標准要求選測定方法的,食品中蛋白質測定的最常用方法當然是凱氮測定法:常量凱氏定氮法和微量凱氏定氮法.
我大學時還做過考馬斯亮藍
半微量定氮法,與最新標准一致,我這有稍微簡化的方法:
以餅干為例:稱取2.000克於定氮瓶中,加20mL濃硫酸,加0.2g硫酸銅,加3.0g硫酸鉀,然後進行消化,消化至澄清液體後倒入100mL具塞比色管,3次清洗定氮瓶,洗液並入100mL具塞比色管,蒸餾水加至100mL刻度線,搖勻,取10mL進半微量定氮裝置蒸餾,收集瓶中為2%硼酸溶液10mL,以甲基紅-亞甲藍為指示劑2滴,用購置的0.1000標准溶液進行滴定,步驟結束.
要點:稱量需准確;吸取也准確;玻璃儀器需檢定合格.
⑸ 蛋白質測定
蛋白質的測定方法如下:
檢查前准備:
准備待測蛋白質溶液,如血清蛋白等,用蒸餾水稀釋蛋白質溶液;如為固體蛋白質,應在105℃環境下烘乾。
操作方法:
1、凱氏定氮法。准備4個50ml凱氏燒瓶並標號,想1、2號燒瓶中加入定量的蛋白質樣品,另外兩個燒瓶作為對照,在每個燒瓶中加入硫酸鉀-硫酸銅混合物,再加入濃硫酸,將4個燒瓶放到消化架上進行消化,之後進行蒸餾,全部蒸餾完畢後用標准鹽酸滴定各燒瓶中收集的氨量,直至指示劑混合液由綠色變回淡紫紅色,即為滴定終點,結算出蛋白質含量。
⑹ 求助,蛋白質溶液的配置
你好,你用PH7.4PBS做稀釋液配製1mg/ml的BSA(牛血清白蛋白)液,再用該液配製你的蛋白溶液
⑺ 國家標准檢測蛋白質含量測定方法
蛋白質含量測定方法就是檢測N元素的含量,像三聚氰胺的問題,就是通過增加N的含量使「蛋白質」含量提高的。
國家標准檢測蛋白質含量的方法叫做凱氏定氮法,食物中的蛋白質在催化加熱條件下分解,導致氨和硫酸結合產生硫酸銨。 鹼蒸餾採用無硫,硼酸吸收,用硫酸或鹽酸標准滴定溶液滴定,根據酸耗計算氮含量,再乘以轉化系數,即蛋白質含量。
具體操作步驟如下:
1.樣品處理
精確稱量0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸收10-20ml液體樣品(約30-40mg氮當量)。將其轉移至乾燥的100毫升或500毫升氮氣固定瓶中,加入0.2克硫酸銅,6克硫酸鉀和20毫升硫酸,輕輕搖動,在瓶口放置一個小漏斗,將瓶子傾斜石棉網上有45度角,有小孔。
加熱小火後,內容物碳化,泡沫完全停止,加強火力,保持瓶內液體稍微沸騰,直至液體呈藍綠色澄清透明,然後繼續加熱0.5小時。取出並冷卻,小心加入20毫升水,冷卻,移入100毫升容量瓶中,用少量水洗凈氮氣瓶,洗凈液放入容量瓶中,然後用水沖洗至刻度,混勻備用。
取相同量的硫酸銅,硫酸鉀和濃硫酸作為試劑進行空白試驗。然而,這種方法很危險,很難在實驗室中證明。大多數實驗室都有一個消化器,可以一次處理16個以上的樣品和一個可以自行設定溫度的呼吸機。它更安全,更可操作。
(7)做蛋白質的指示劑怎麼配置擴展閱讀
除了凱氏定氮法以外,標準的測量方法還有:
分光光度法
食品中的蛋白質在催化加熱條件下被分解,分解產生的氨與硫酸結合生成硫酸銨,在pH4.8的乙酸鈉-乙酸緩沖溶液中與乙醯丙酮和甲醛反應生成黃色的3,5-二乙醯-2,6-二甲基-1,4-二氫化吡啶化合物。在波長400nm 下測定吸光度值,與標准系列比較定量,結果乘以換算系數,即為蛋白質含量。
燃燒法
樣品在900~1200℃下燃燒。在燃燒過程中,產生混合氣體。 諸如碳,硫和鹽的干擾氣體被吸收管吸收,氮氧化物被還原成氮。 形成的氮氣流由熱導檢測器(TCD)檢測。
⑻ 求常用指示劑溶液的配置方法
1、二苯胺磺酸鈉指示液:
取二苯胺磺酸鈉0.2g,加水100ml使溶解,即得。
2、二苯偕肼指示液:
取二苯偕肼1g,加乙醇100ml使溶解,即得。
3、雙硫腙指示液:
取雙硫腙50mg,加乙醇100ml使溶解,即得。
4、石蕊指示液:
取石蕊粉末10g,加乙醇40ml,迴流煮沸1小時,靜置,傾去上層清液,再用同一方法處理二次,每次用乙醇30ml,殘渣用水10ml洗滌,傾去洗液,再加水50ml,煮沸,放冷,濾過,即得。變色范圍 pH4.5~8.0(紅→藍)。
5、甲酚紅指示液:
取甲酚紅0.1g,加0.05mol/L氫氧化鈉溶液5.3ml使溶解,再加水稀釋至100ml,即得。變色范圍 pH7.2~8.8(黃→紅)
6、甲酚紅-麝香草酚藍混合指示液:
取甲酚紅指示液1份與0.1%麝香草酚藍溶液3份,混合,即得。
甲基紅指示液取甲基紅0.1g,加0.05mol/L氫氧化鈉溶液7.4ml使溶解,再加水稀釋至200ml,即得。變色范圍 pH4.2~6.3(紅→黃)。
7、甲基紅-亞甲藍混合指示液:
取0.1%甲基紅的乙醇溶液20ml,加0.2%亞甲藍溶液8ml,搖勻,即得。
8、甲基紅-溴甲酚綠混合指示液:
取0.1%甲基紅的乙醇溶液20ml,加0.2%溴甲酚綠的乙醇溶液30ml,搖勻,即得。
9、甲基橙指示液:
取甲基橙0.1g,加水100ml使溶解,即得。變色范圍 pH3.2~4.4(紅→黃)。
10、甲基橙-二甲苯藍FF混合指示液:
取甲基橙與二甲苯藍FF各0.1g,加乙醇100ml使溶解,即得。
11、鄰二氮菲指示液:
取硫酸亞鐵0.5g,加水100ml使溶解,加硫酸2滴與鄰二氮菲0.5g,搖勻,即得。本液應臨用新制。
12、茜素磺酸鈉指示液:
取茜素磺酸鈉0.1g,加水100ml使溶解,即得。變色范圍 pH3.7~5.2(黃→紫)
13、熒光黃指示液:
取熒光黃0.1g,加乙醇100ml使溶解,即得。
14、鈣黃綠素指示劑:
取鈣黃綠素0.1g,加氯化鉀10g,研磨均勻,即得。
15、鈣紫紅素指示劑:
取鈣紫紅素0.1g,加無水硫酸鈉10g,研磨均勻,即得。
16、姜黃指示液:
取姜黃粉末20g,用冷水浸漬4次,每次100ml,除去水溶性物質後,殘渣在100℃乾燥,加乙醇100ml,浸漬數日,濾過,即得。
17、結晶紫指示液:
取結晶紫0.5g,加冰醋酸100ml使溶解,即得。
18、酚酞指示液:
取酚酞1g,加乙醇100ml使溶解,即得。變色范圍 pH8.3~10.0(無色→紅)。
19、鉻黑T指示劑:
取鉻黑T 0.1g,加氯化鈉10g,研磨均勻,即得。
20、澱粉指示液:
取可溶性澱粉0.5g,加水5ml攪勻後,緩緩傾入100ml沸水中,隨加隨攪拌,繼續煮沸2分鍾,放冷,傾取上層清液,即得。本液應臨用新制。
21、硫酸鐵銨指示液:
取硫酸鐵銨8g,加水100ml使溶解,即得。
22、溴酚藍指示液:
取溴酚藍0.1g,加0.05mol/L氫氧化鈉溶液3.0ml使溶解,再加水稀釋至200ml,即得。變色范圍 pH2.8~4.6(黃→藍綠)。
23、溴麝香草酚藍指示液:
取溴麝香草酚藍0.1g,加0.05mol/L氫氧化鈉溶液3.2ml使溶解,再加水稀釋至200ml,即得。變色范圍 pH6.0~7.6(黃→藍)。
24、麝香草酚酞指示液:
取麝香草酚酞0.1g,加乙醇100ml使溶解,即得。變色范圍 pH9.3~10.5(無色→藍)。
25、麝香草酚藍指示液:
取麝香草酚藍0.1g,加0.05mol/L氫氧化鈉溶液4.3ml使溶解,再加水稀釋至200ml,即得。變色范圍 pH1.2~2.8(紅→黃);pH8.0~9.6(黃→紫藍)。答案來自
⑼ 蛋白質標准溶液配製方法
標准溶液通常用碳酸鈣基準試劑來配置.08/。鈣的原子量是40,加適量蒸餾水,加熱煮沸1—2分鍾.03=2,分解完全後.08.03,冷卻,1克鈣相當於100。配置,碳酸鈣分子量是100;ml即1g/,置於300毫升的燒杯中.5001克碳酸鈣,1mg/40.5001克已於100—110攝氏度乾燥至恆重的碳酸鈣基準試劑,稀釋至刻度搖勻,加10毫升鹽酸(1+1),移於1000毫升容量瓶中;l:准確稱取2