乙腈標樣存儲

1. 液相色譜的流動相能放置多長時間

一般要看流動相的組成了。

經典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。分離後的樣品是被分級收集後再進行分析的，使得經典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢，而且操作也比較復雜。

直到20世紀60年代．發展出粒度小於10μm的高效固定相，並使用了高壓輸液泵和自動記錄的檢測器，克服了經典液相色譜的缺點，發展成高效液相色譜，也稱為高壓液相色譜。

液相色譜所用基本概念：

保留值、塔板數、塔板高度、分離度、選擇性等與氣相色譜一致。液相色譜所用基本理論：塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致，但由於在液相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動相，而液體和氣體的性質不相同。

此外，液相色譜所用的儀器設備和操作條件也與氣相色譜不同，所以，液相色譜與氣相色譜有一定的差別。

2. 農葯殘留氣相色譜法檢測前處理注意事項

具體方法，農業行業標准761有！樓主問注意事項，那麼按經驗給您提供幾點參考！
1、第一步進行制樣的時候，要注意把樣品打碎，打均勻，以便提取的時候能充分；
2、稱樣的時候，盡量不要將樣品沾到稱樣瓶緊鄰瓶口的地方，這個在加入乙腈提取液的時候，不容易沖刷下去，帶來系統誤差；
3、均漿時，時間2min，樣品與加標樣的均漿時間尤其要等同；
4、過濾的步驟中，如含有膠質的難過濾樣品，可用抽濾裝置；
5、氯化鈉的量要適量，太少分層不明顯；
6、靜置具塞量筒時，時間不能少於30min,否則乙腈相與水相分層不徹底；
7、凈化步驟中，通入氮氣流量不能過大，否則容易使乙腈溶液飛濺而出，蒸發近干，切記不能蒸干，否則回收不好影響結果；
8、轉移至離心管中使，用約3ml丙酮分三次沖洗燒杯，此步驟不能忘了在漩渦振盪器上混勻再裝瓶；
以上為上PFD檢測器檢測，如果上ECD，則需要注意過柱步驟，預淋洗，條件化弗羅里矽柱時，一定不能讓柱子干，洗脫時也是一樣，否則影響回收，帶來誤差。
另外，這些步驟必須在通風廚中進行，否則影響操作者健康。
一時只能想起這么多，希望對你有幫助，如有別的問題需要探討，歡迎樓主找我！

3. 萃取用乙腈溶的標曲可以用別的不

做曲線稀釋的話用其他溶劑也可以,但最好還是用甲醇稀釋.
做水樣前處理的時候需要的萃取衍生等等,做標准曲線的時候不需要做需要萃取衍生.

4. 六種苯酚類化合物的高效液相色譜法測定

方法提要

在酸性條件下，用GDX-502固相萃取柱吸附水中酚類化合物，乙腈解析柱中有機酚，高效液相色譜-紫外檢測器檢測。

方法適用於飲用水、地下水及湖庫水中苯酚、對硝基酚、間甲酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚6種酚類的測定。對水中6種酚通常可檢測到10～50ng/L水平。

儀器

高效液相色譜儀帶紫外檢測器，恆流梯度泵系統。

色譜柱WatersSymmetry^C₈，4.6mm×250mm，粒徑5μm或性質相似的色譜柱。

GDX-502固相萃取小柱將使用過的SPE小柱填充物去掉並清洗干凈，濕法加入約為0.5g純化溶脹後的GDX-502樹脂，打開活塞放出甲醇，直到液面剛好達到樹脂床頂部。用10mL乙腈淋洗樹脂，再用10mL水淋洗樹脂，每次淋洗保持液面不低於樹脂床。

針頭過濾器孔徑0.45μm，直徑13mm，有機系。

固相萃取裝置12管固相萃取裝置。

真空泵。

采樣瓶1L具磨口玻璃塞的棕色玻璃細口瓶。

氮吹儀。

微量注射器10μL、50μL、100μL、1000μL等氣密性微量注射器。

K.D濃縮瓶25mL，帶1mL定量管，須標定容積後使用。

試劑

空白試劑水去離子水蒸餾再經Millipore處理。

高效液相色譜流動相為水(含1%乙酸)和乙腈的混合溶液。

碳酸氫鈉溶液c(NaHCO₃)=0.05mol/L。

硫代硫酸鈉(Na₂S₂O₃·5H₂O)。

乙腈，甲醇HPLC級。

丙酮(C₃H₆O)農殘級。

乙酸。

鹽酸。

標准儲備溶液苯酚、對硝基酚、間甲酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚六種的混標，購自國家標准物質研究中心。保存在-18℃冰箱中。

GDX-502樹脂使用前用丙酮浸泡數日，數次更換新溶劑到丙酮無色。再用乙腈迴流提取6h以上。純化後的樹脂密封保存在甲醇中備用。

替代物標准2-氟苯酚和2，4，6-三溴苯酚混標。

樣品的採集與保存

1)水樣採集。必須採集在玻璃容器中，在采樣點采樣及蓋好瓶塞時，樣品瓶要完全注滿，不留空氣。若水中有殘余氯存在，要在每升水中加入80mg硫代硫酸鈉除氯。

2)水樣保存。避光、4℃下中保存。采樣後7d內完成提取。40d內完成分析。

分析步驟

1)水樣預處理。用孔徑0.45μm的玻璃纖維濾膜，去除水中機械雜質。根據水中酚類化合物含量，取水樣50～1000mL，加入2-氟苯酚和2，4，6-三溴苯酚等替代物標准，用6mol/LHCl調至pH2。水樣以10mL/min的流速流經已活化的GDX-502固相萃取柱。當水樣完全流過柱子後，用0.05mol/L碳酸氫鈉溶液10mL淋洗柱子。用N₂或空氣將柱中水分充分抽干。用4mL每次1mL乙腈淋洗小柱，前兩次淋洗液需在柱中平衡10min，後兩次平衡2min，合並淋洗液，最終用乙腈定容為1.00mL。0.45μm有機相濾膜過濾，HPLC分析。

2)校準曲線。

3)高效液相色譜分析條件。

紫外檢測器:雙波長檢測，檢測波長280nm和290nm。柱溫35℃。

流動相組成:A泵，99%水+(1+99)乙酸;B泵，100%乙腈。

流動相流量:1mL/min，恆流。梯度洗脫，洗脫程序，見表82.41。

表82.41 洗脫程序

4)色譜圖的考察。見圖82.13。

定性與定量分析

1)定性分析。以樣品保留時間和標樣保留時間相比較來定性。根據標准色譜圖各組分的保留時間，確定出被測樣品中目標物數目和名稱。對有檢出的樣品需用其他方法確證，如GC-MS等技術。

圖82.13 六種標准酚類樣品在不同檢測波長下的液相色譜圖(2μg/mL)

2) 定量分析。每個工作日必須測定一種或幾種濃度的標准溶液來檢驗校準曲線或響應因子。如若某一化合物的響應值與預期值間的偏差大於 10%，則必須用新的標准對該化合物繪制新的校準曲線或求出新的響應因子。使用紫外檢測器時，6 種酚類的最大吸收波長不同，為提高分析靈敏度，苯酚、間甲酚採用 280nm 波長定量; 對硝基酚、2，4 -二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚採用 290nm 波長定量。計算公式參見式 (82.16) 。

方法性能指標

1) 精密度、檢出限和線性范圍。按實驗方法，配製濃度為 0.5μg / mL 酚類混合標准樣品，按選定的工作條件分析，重復檢測 7 次，計算方法的精密度。檢出限的測量是以相對於基線噪音 3 倍時組分峰高所對應的濃度。各組分的精密度、檢測下限和線性范圍見表82.42。

表82.42 方法精密度、檢出限及線性范圍

2) 准確度。分別將 50μL 濃度為 2μg / mL 的混合標准樣品加入 0.25L 和 1.0L 試劑空白水中，用 502 樹脂固相萃取柱吸附富集，洗脫後定容 1.0mL，HPLC 測定，計算加標回收率。結果見表82.43。

表82.43 方法的准確度

3) 基體加標回收率。從北京不同地區取護城河水過濾後，分別取 1L 水加入表82.44中不同量的標准樣品，及未加入標准樣品的 1L 水，經水樣預處理，在 HPLC 上檢測，得到加標回收率。

表82.44 地表污水加標回收率

注: 2-氟苯酚、2，4，6-三溴苯酚為替代物，回收率均符合控制限要求。

5. 高效液相 99%乙腈流動相 什麼物質大約5分鍾出峰

這個問題沒辦法回答。
第一，不知道波長，第二，不知道柱填料，第三不知道流速，這根本沒辦法判斷。
而且，5min出峰，大約就是說這個物質在色譜柱中基本沒有保留，還說不定是雙氧水或者什麼溶劑的峰呢。

液相不可能從保留時間判斷出一個物質的，液相沒有這個功能。除非你知道這個物質可能是A、B或者是C，然後進標樣，對比後確定它是哪一個。

6. 做高液相時標樣出峰時間越來越晚是什麼原因

會不會是你實驗室溫度較高，流動相中的有機物揮發的緣故？甲醇和乙腈的揮發性都比較大。要保證流動相混合均勻，然後盡量密封。
或者和色譜柱有關，你的流動相中有沒有什麼需要長時間緩沖的物質，需要的平衡時間相對較強。
另外要看一看你的色譜柱柱壓，是不是柱子堵了，壓力上升，導致色譜峰前移。

一般一天之內色譜峰前後偏移1min都是可以接受的。

7. 測鄰苯二甲酸的紫外吸收時為什麼用標樣進行測試

測鄰苯二甲酸的紫外吸收用標樣進行測試是因為，
鄰苯二甲酸酯可以通過呼吸、飲食和皮膚接觸進入人和動物體內。急性吸入鄰苯二甲酸酯蒸汽後，可出現上呼吸道和眼結膜刺激症狀。皮膚長期接觸會出現致敏反應。其急性毒性隨分子中醇基碳原子數的增加而減弱，具有中度積蓄作用，鄰苯二甲酸酯類對大鼠有致突、致畸作用，對水生生物的急性毒性很低，但對某些水生種屬有蓄積作用，能造成生殖吸引損害。隨著工農業生產的發展和塑料製品的廣泛使用，鄰苯二甲酸酯類已經成為全球性的最普遍的一類持久性環境污染物

8. 標樣配在甲醇和乙腈會不會響應值差一倍

你把標液分別配在甲醇和乙腈里，看響應值差多少，按說不會差那麼多。
而且你標液的溶劑要與樣品溶劑保持一致

9. 測完標樣，液相色譜柱壓很高，求助原因和解決方法

用完色譜柱要及時清洗。你說換柱後，顯示柱壓很高，有出峰，說明柱子沒洗干凈。另外，如果用了含緩沖鹽體系的流動相，一定要先用10%甲醇or乙腈先過渡。以免有鹽在管路中析出，損傷儀器和色譜柱。
另外，更換色譜柱時，在低流速（比如0.1ml/min）下換挺好的。最好要戴手套。關泵換問題也不大。
如果管路中進氣泡，出的峰是很尖銳的，且壓力不穩，跳上跳下很明顯的。你的情況應該不是進氣泡造成的。
最後補充一下，如果色譜柱長期沒有用過，最好每隔2個月用有機相沖洗一下柱子。大約1ml/min，沖半小時。
以上所說的僅適用於反向柱。

10. 用乙腈溶解的標樣跑的還可以,用甲醇溶解的出現肩峰

你只進一針甲醇,看一下同一個時間會不會出峰,如果出同樣的峰的話,就是溶劑峰.如果樣品在這個時間沒有雜質峰出現的話,不用管它,不積分就可以了.